副溶血弧菌恒温荧光快速检测试剂盒

【产品名称】副溶血弧菌荧光快速检测试剂盒

【货号】PA004DE

【储存条件及有效期】

1. 储存条件：温度 ≤ -20 ℃恒温环境，避光保存，避免重压；

2. 产品有效期：14 个月；3. 生产日期：见外包装。

【产品用途】

本产品用于新鲜或冷冻的成虾、幼虾、虾苗及其生物饲料、水体环境中的副溶血弧菌（VP）的检测。

【主要组成】

【适用仪器】

适用我司的PA-RT-F16实时荧光检测仪及PA-PS-F8数字化荧光检测仪。

【自备耗材和仪器】

移液器（10～100μL 量程）及配套灭菌吸头。

【注意事项】

1. 使用前请仔细阅读说明书，严格按照操作步骤进行操作；

2. 使用试剂前，先检查管底的干粉和微球是正常、干燥，如试剂吸潮液化则不能使用；

3. 本试剂盒检测灵敏度高，实验需分区域进行，各区域仪器耗材不得混用，避免交叉污染；

4. 样品处理应该严格按照生物安全规范操作，实验过程中应穿着工作服，戴一次性手套，进入不同区域应更换工作服和手套；

5. 反应结束后扩增管置于密封袋内，密封丢弃处理，严禁开盖；

6. 使用有效期内试剂，且各组分不得与其他批号混用，试剂盒各液体组分使用前室温充分融化后混匀，短暂离心后使用。

【样本要求】

1. 按照相关标准采集样本；

2. 按照试剂盒配套的水生动物病原体核酸提取试剂盒说明书处理样本；

3. 样本采集后建议尽快检测。

【检测方法】

1.试剂准备（试剂准备区）

1.1 取出包装盒中的液体组分，室温放置，融化后混匀，瞬时离心备用（注意，如未完全融化直接使用可能对实验效果产生影响）；

1.2 根据待测样本、阴性和阳性对照的数量准备冻干试剂。

2. 样本处理（样本处理区）

2.1 提取核酸

参考水生动物病原体核酸提取试剂盒说明书处理样本并提取样本核酸；

2.2 添加模板

向冻干试剂反应管中加入 50 μL 核酸模板（阴、阳性对照组分别加入 50μL 阴性对照、VP 阳性对照），上下颠倒反应管 8～10 次充分混合，混匀后，将反应液甩（或快速离心）至管子底部，转移至扩增区。

3.核酸扩增（扩增区）

3.1 使用我司 PA-RT-F16 实时荧光检测仪

3.1.1 程序设置

a. 参考仪器说明书，连接电源，按下仪器背面电源键，开机后登陆进入主页面，点击左侧“扩增”，选择“DNA 模式”，根据检测数量选择“8 孔同步”或“16 孔同步”，点击左下角“+”新建实验，选择检测程序“D-TEST1”，检测波长“FAM”，根据检测数量选择 A 舱、B 舱（每个反应舱可检

测 8 个样本）；

b. 将试剂放入选择的反应舱中，关闭上盖，点击运行键，跳出弹窗点击“√”，开始扩增检测。

3.1.2 质量控制

阴性对照 TT 值≥35 或未检出；阳性对照 TT 值≤ 20；同一实验需同时满足以上要求，否则本次实验视为无效。

3.1.3 结果判读

仪器自动生成荧光曲线及对应结果和 TT 值，各项参数符合“3.1.2 质量控制”中的要求，然后进行阴阳性判定：

a. FAM 通道仪器显示+，TT 值≤35：阳性结果，该样本中含有病原体核酸；

b. FAM 通道仪器显示+，TT 值＞35：疑似阳

性，需复检；若复检结果为+，该样本为阳性结果；

c. FAM 通道仪器显示-，无 TT 值：阴性结果，该样本中无病原体核酸，或含量低于试剂盒检测下限。

3.2 使用我司 PA-PS-F8 数字化荧光检测仪

3.2.1 程序设置

a. 参考仪器说明书，连接电源，按下仪器侧面电源键，开机备用；

b. 打开仪器上盖，将试剂放入孔位，关闭上盖，点击仪器正面右侧运行键，开始扩增检测。

3.2.2 质量控制

阴性对照显示数值为 00；阳性对照显示数值为 01；同一实验需同时满足以上要求，否则本次实验视为无效。

3.2.3 结果判读

仪器自动生成数值，各项参数符合“3.2.2 质量控制”中的要求，然后进行阴阳性判定：

a. 显示数值 01，阳性结果，该样本中含有病原体核酸；

b. 显示数值 00，阴性结果，该样本中无病原体核酸，或含量低于试剂盒检测下限。

【检验结果的解释】

1. 样本采集、运输、保存不当，试剂运输、保存、配制不当都可能会影响实验结果，甚至会导致假阴性结果；

2. 如果实验室污染、试剂污染、样品交叉污染，可能出现假阳性结果；

【厂家信息】

企业名称：安普未来（常州）生物科技有限公司

地址：江苏省常州市武进区常武中路 18-67 号中国以色列常州创新园 9#厂房 4 层

企业名称：潍坊安普未来生物科技有限公司

地址：山东省潍坊市高新区高新二路 36 号孵化器大楼 F201

技术服务电话：18068763522