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DNA 恒温快速扩增试剂盒(荧光型)

产品编号
WLE8202KIT
每盒
  1. 48T
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产品说明

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DNA 恒温快速扩增试剂盒(荧光型)使用说明书

【产品名称】

通用名称:DNA 恒温快速扩增试剂盒(荧光型)

【包装规格】

货号:WLE8202KIT

规格:48 份/盒

【原理概述】

本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术:在常温恒温下,重组酶和引物形成蛋白/单链核苷酸的复合体 Rec/ssDNA,在辅助蛋白和单链结合蛋白 SSB 的帮助下,侵入双链 DNA 模板;在侵入位点形成 D-loop区域,并开始对 DNA 双链进行扫描;待找到与引物互补的目的区域后,复合体Rec/ssDNA 解体的同时,聚合酶也结合到引物的 3’末端,开始链的延伸。本试剂盒在39 ºC 下,依赖核酸外切酶的作用,加入根据模板设计的特异的分子探针,使用荧光监测设备能实现对目标片段扩增过程的实时监控。

原理1.jpg

原理2.jpg

【产品特点】

本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、反应时间短(仅需 20 min)等优点,反应组分为干粉状态,操作简便,易于保存。

可适用于各种品牌的荧光定量 PCR 仪、恒温荧光扩增仪器等荧光检测设备。

【引物设计】

建议使用长度在 30-35 bp 的引物,引物过短会影响扩增速度和检测灵敏度;引物设计避免形成二级结构而影响扩增;扩增子长度建议在 150-300 bp,通常不超过 500 bp。

【荧光探针设计】

探针序列不与特异性引物识别位点重叠,长度为 46-52 nt,序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。探针共有四个修饰位点:距离 5’端的≥ 35 nt 的中部位置标记一个 dSpacer(四氢呋喃,THF),作为核酸外切酶的识别位点;THF 位点的上游标记一个荧光基团,下游标记一个粹灭基团,两个基团的间距为2-4 nt;THF 距离3’末端≥15 nt,并且 3’末端标记一个修饰基团,例如胺基、磷酸基团或 C3-Spacer。

【试剂盒组成】

组成

含量

A buffer

1.6 mL×1

B buffer

150 μL×1

正对照模板

100 μL×1

正对照引物探针Mix

70 μL×1

试剂

48

使用说明书

1

A buffer主要为稳定蛋白/酶,性能的缓冲体系

B buffer主要由镁离子等激活体系

正对照模板主要是阳性质粒模版为检验试剂盒的有效

正对照引物MIX主要是正对照模版的引物组合

蛋白/酶体系的试剂(含外切酶)工艺:冻干、微球

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【试剂盒储存】

1.  运输温度:≤ 20 ºC的恒温环境;

2.储存条件:储存温度 ≤ -20 °C(± 5 °C)恒温环境,避光保存,避免重压、反复冻融;

3.产品有效期:14个月;

4.生产日期见外包装。

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图 1. P:正对照;N:阴性对照

【注意事项】

由于试剂盒灵敏度非常高,在进行反应时请注意避免核酸污染,并设置空白对照;

使用时请取出实验所需的 MIRA 反应单元的数量,剩余部分请置于存储条件下。


了解详细产品信息,下方扫码添加对应区域销售,感谢您对安普未来的支持!

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